AccuSpot

El AccuSpot automatiza el microfraccionamiento por HPLC, sembrado y preparación de muestras para análisis por espectrometría de masas (MS).

Con el sistema AccuSpot, el eluído cromatográfico puede ser sembrado en placas en forma exacta y continua, en volúmenes desde 50nL (nanolitros). Esto permite la preparación automática de placas para medición por MALDI-TOF-MS.

Usado conjuntamente con los sistemas Shimadzu de micro LC mono y bi-dimensionales y con los instrumentos AXIMA MALDI-TOF, el análisis proteómico puede ser realizado con un mayor grado de precisión y con mayor cobertura de secuencias.

Tecnología AccuSpot

Diseñado para colección on-line de fracciones eluídas de HPLC capilar o Nano-LC.
Soporta el microfraccionamiento de "targets" MALDI-TOF/MS, en placas de 96 ó 384 pozos.

Permite el sembrado continuo en múltiples placas. El cambiador automático permite sembrar hasta 9 placas sin interrupciones.

Se pueden agregar automáticamente soluciones de matrices MALDI. Las placas pueden ser sembradas mientras se agregan automáticamente soluciones de matriz al eluido del LC.
Monitor de sembrado estándar. El sistema incluye una cámara CCD como accesorio estándar, la que permite el monitoreo del proceso de sembrado en la pantalla de la PC.

La LC-MS/MS es vista generalmente como la técnica de elección para identificar los componentes de mezclas complejas. Sin embargo, la técnica tiene sus limitaciones. LC-MALDI tiene algunas ventajas y es una alternativa a considerar:

• El LC y el espectrómetro de masas MALDI están desacoplados, no se requiere una interfaz.
• Más alta adquisición de datos en la cima del pico eluido permite una selección precisa de los iones precursores para análisis MS/MS.
• La identificación de péptidos isobáricos (en LC/MS/MS automatizada las estrategias de exclusión de iones frecuentemente pierden iones en compuestos relacionados)
• Archivo de muestras: Las placas MALDI pueden ser guardadas y usadas para posterior validación de la identificación de proteínas si se requiere)
• Sensibilidad sin compromisos: el análisis MALDI s epuede enfocar en el ápice del pico LC
• Mayor profundidad de cobertura de la muestra y cobertura extendida de secuencias de proteínas detectadas.

Técnica de sembrado AccuSpot

Para asegurar un microfraccionamiento reproducible y exacto, la gota es transferida desde un capilar estático, siendo la placa MALDI la que se mueve.

Paso 1 - formación de la gota

El capilar está fijo y la placa MALDI en posición "standby".

Paso 2 - deposición de la gota

La placa MALDI es movida con precisión hacia la gota

Paso 3 - Reset

La placa MALDI vuelve a la posición "standby".

El mecanismo de sembrado

• La solución matriz MALDI se agrega a la sonda capilar de sembrado
• El capilar externo se usa para limpiar la punta del capilar

Alta capacidad de muestras

Se pueden cargar simultáneamente hasta 9 placas de microtitulación de 96 o 384 posiciones cada una. Está disponible en forma opcional un lector de códigos de barras para facilitar el seguimiento de las muestras.

Carga de muestras muy flexible

La solución de matriz puede ser agregada con caudales entre 0,1 uL/minuto hasta 50uL/minuto. Para adaptarse a diferentes necesidades, la dirección de sembrado puede ser recta o en zigzag. Para asegurar que la formación y la colección de las gotas es consistente, se usa una cámara CCD para monitorear el micro-fraccionamiento.

Modo de siembra de muestra exclusivo

Utiliza el método de sembrado de "medio contacto" usando sensores de placa (patente pendiente).

Modo Preparatorio

Modo continuo (sembrado por período fijo de tiempo). Modo en tiempos específicos (sembrado continuo sólo en un período dado) 5 a 60 segundos / punto.